Příprava NaOH
Připravte nový roztok 0,2 N NaOH sodium hydroxide k denaturaci knihoven pro sekvenování. Připraví se dodatečný objem, aby se zabránilo drobným chybám při pipetování, které by mohly ovlivnit konečnou koncentraci NaOH.
| 1. | [25B] Nakombinujte následující objemy ve zkumavce mikroodstředivky. |
|
Reagencie |
Objem pro jednu Průtoková kyveta 25B (μl) |
Objem pro dvě Průtoková kyveta 25B (μl) |
|---|---|---|
|
Voda laboratorní jakosti |
120 |
240 |
|
Zásoby 1N NaOH |
30 |
60 |
Výsledkem těchto objemů je 150 µl 0,2 N NaOH pro jednu průtokovou kyvetu nebo 300 µl 0,2 N NaOH pro dvě průtokové kyvety.
| 2. | [10B] Nakombinujte následující objemy ve zkumavce mikroodstředivky. |
|
Reagencie |
Objem pro jednu Průtoková kyveta 10B (μl) |
Objem pro dvě Průtoková kyveta 10B (μl) |
|---|---|---|
|
Voda laboratorní jakosti |
80 |
160 |
|
Zásoby 1N NaOH |
20 |
40 |
Výsledkem těchto objemů je 100 µl 0,2 N NaOH pro jednu průtokovou kyvetu nebo 200 µl 0,2 N NaOH pro dvě průtokové kyvety.
| 3. | [1,5B] Nakombinujte následující objemy ve zkumavce mikroodstředivky. |
|
Reagencie |
Objem pro jednu Průtokovou kyvetu 1,5B (μl) |
Objem pro dvě Průtokovou kyvetu 1,5B (μl) |
|---|---|---|
|
Voda laboratorní jakosti |
20 |
40 |
|
Zásoby 1N NaOH |
5 |
10 |
Výsledkem těchto objemů je 25 µl 0,2 N NaOH pro jednu průtokovou kyvetu nebo 50 µl 0,2 N NaOH pro dvě průtokové kyvety.
| 4. | Zamíchejte a poté zkumavku odstřeďte, aby se promíchala. |
