Klargør NaOH
Klargør en frisk fortynding af 0,2 N NaOH natriumhydroxid til denaturering af biblioteker til sekvensering. Ekstra volumen klargøres for at forhindre små pipetteringsfejl i at påvirke den endelige NaOH-koncentration.
| 1. | [25B] Kombinér følgende volumener i et mikrocentrifugerør. |
|
Reagens |
Volumen for en 25B‑flowcelle (μl) |
Volumen for to 25B‑flowcelles (μl) |
|---|---|---|
|
Vand af laboratoriekvalitet |
120 |
240 |
|
Lager 1N NaOH |
30 |
60 |
Disse volumener resulterer i 150 μl 0,2 N NaOH for én flowcelle eller 300 μl 0,2 N NaOH for to flowceller.
| 2. | [10B] Kombinér følgende volumener i et mikrocentrifugerør. |
|
Reagens |
Volumen for en 10B‑flowcelle (μl) |
Volumen for to 10B‑flowcelles (μl) |
|---|---|---|
|
Vand af laboratoriekvalitet |
80 |
160 |
|
Lager 1N NaOH |
20 |
40 |
Disse volumener resulterer i 100 μl 0,2 N NaOH for én flowcelle eller 200 μl 0,2 N NaOH for to flowceller.
| 3. | [1.5B] Kombinér følgende volumener i et mikrocentrifugerør. |
|
Reagens |
Volumen for en 1.5B‑flowcelle (μl) |
Volumen for to 1.5B‑flowcelles (μl) |
|---|---|---|
|
Vand af laboratoriekvalitet |
20 |
40 |
|
Lager 1N NaOH |
5 |
10 |
Disse volumener resulterer i 25 μl 0,2 N NaOH for én flowcelle eller 50 μl 0,2 N NaOH for to flowceller.
| 4. | Bland på vortexblander, og centrifugér derefter røret for at blande. |
