Προετοιμασία του NaOH
Παρασκευάστε νέα αραίωση 0,2 N NaOH υδροξείδιο του νατρίου για μετουσίωση βιβλιοθηκών προς αλληλούχηση. Παρασκευάζεται επιπλέον όγκος για να αποτραπεί η επίδραση μικρών σφαλμάτων αναρρόφησης στην τελική συγκέντρωση NaOH.
1. | [25B] Συνδυάστε τους παρακάτω όγκους σε ένα σωληνάριο μικροφυγοκέντρησης. |
Αντιδραστήριο |
Όγκος για ένα Κυψελίδα ροής 25B (μl) |
Όγκος για δύο Κυψελίδα ροής 25B (μl) |
---|---|---|
Νερό εργαστηριακής ποιότητας |
120 |
240 |
Απόθεμα 1N NaOH |
30 |
60 |
Αυτοί οι όγκοι έχουν ως αποτέλεσμα 150 μl 0,2 N NaOH για μία κυψελίδα ροής ή 300 μl 0,2 N NaOH για δύο κυψελίδες ροής.
2. | [10B] Συνδυάστε τους παρακάτω όγκους σε ένα σωληνάριο μικροφυγοκέντρησης. |
Αντιδραστήριο |
Όγκος για ένα Κυψελίδα ροής 10B (μl) |
Όγκος για δύο Κυψελίδα ροής 10B (μl) |
---|---|---|
Νερό εργαστηριακής ποιότητας |
80 |
160 |
Απόθεμα 1N NaOH |
20 |
40 |
Αυτοί οι όγκοι έχουν ως αποτέλεσμα 100 μl 0,2 N NaOH για μία κυψελίδα ροής ή 200 μl 0,2 N NaOH για δύο κυψελίδες ροής.
3. | [1.5B] Συνδυάστε τους παρακάτω όγκους σε ένα σωληνάριο μικροφυγοκέντρησης. |
Αντιδραστήριο |
Όγκος για ένα Κυψελίδα ροής 1,5B (μl) |
Όγκος για δύο Κυψελίδα ροής 1,5B (μl) |
---|---|---|
Νερό εργαστηριακής ποιότητας |
20 |
40 |
Απόθεμα 1N NaOH |
5 |
10 |
Αυτοί οι όγκοι έχουν ως αποτέλεσμα 25 μl 0,2 N NaOH για μία κυψελίδα ροής ή 50 μl 0,2 N NaOH για δύο κυψελίδες ροής.
4. | Αναδεύστε και κατόπιν φυγοκεντρήστε το σωληνάριο για να αναμειχθεί. |