Preparación y adición de cebadores personalizados

Los cebadores personalizados se preparan con el tampón de cebador personalizado de NovaSeq X Series y, a continuación, se añaden al cartucho de reactivos. Asegúrese de que el cartucho de reactivos esté descongelado y se haya inspeccionado antes de continuar.

Preparación de cebadores personalizados

1.

Si están congelados, descongele los cebadores personalizados que vaya a utilizar.

2.

Utilice el tampón de cebador personalizado de NovaSeq X Series para diluir cebadores personalizados con el fin de producir los volúmenes siguientes a una concentración final de 0,3 μM. Cuando se combinan cebadores para hacer la mezcla de cebadores personalizados de lectura de índice o de cualquier tipo de cebadores personalizados de lectura, cada cebador debe estar a una concentración final de 0,3 µM.

Cebador personalizado	Volumen (ml) para Celda de flujo 1.5B	Volumen (ml) para Celda de flujo 10B o 25B
Cebador personalizado de la lectura 1	3,0	5,0
Cebador personalizado de la lectura 2	3,0	5,0
Mezcla de cebadores personalizados de los índices 1 y 2	5,0	6,0

Adición de cebadores personalizados

1.

Utilice una toallita termosellada de Polynit para limpiar la lámina metálica de cierre que cubre cada posición de cebador personalizado.

Posición	Cebador personalizado
CP1	Cebador personalizado de la lectura 1
CP2	Cebador personalizado de la lectura 2
CP3	Mezcla de cebadores personalizados de los índices 1 y 2

2.

Con una punta de pipeta limpia, perfore la lámina metálica de cierre que cubre cada posición de cebador personalizado.

3.

Añada los volúmenes siguientes de cebador personalizado a la posición adecuada en el cartucho de reactivos. Evite tocar la lámina metálica de cierre cuando dispense el cebador.

Posición	Cebador personalizado	Volumen (ml) para Celda de flujo 1.5B	Volumen (ml) para Celda de flujo 10B o 25B
CP1	Cebador personalizado de la lectura 1	3.0	5.0
CP2	Cebador personalizado de la lectura 2	3.0	5.0
CP3	Mezcla de cebadores personalizados de los índices 1 y 2	5.0	6,0