NaOH:n valmisteleminen

Valmistele uusi 0,2 N NaOH natriumhydroksidi -liuoksen laimennus kirjastojen denaturoimiseksi sekvensointia varten. Ylimääräinen tilavuus valmistellaan, jotta pienet pipetointivirheet eivät vaikuta lopulliseen NaOH-pitoisuuteen.

1. [25B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa.

Reagenssi

Tilavuus yhtä 25B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl)

Tilavuus: kahta 25B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl)

Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi

120

240

Kantaliuos 1N NaOH

30

60

Näiden tilavuuksien tuloksena on 150 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 300 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.

2. [10B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa.

Reagenssi

Tilavuus yhtä 10B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl)

Tilavuus: kahta 10B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl)

Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi

80

160

Kantaliuos 1N NaOH

20

40

Näiden tilavuuksien tuloksena on 100 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 200 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.

3. [1.5B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa.

Reagenssi

Tilavuus yhtä 1.5B-virtauskyvetille-virtauskyvettiä varten (µl)

Tilavuus: kahta 1.5B-virtauskyvetille-virtauskyvettiä varten (µl)

Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi

20

40

Kantaliuos 1N NaOH

5

10

Näiden tilavuuksien tuloksena on 25 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 50 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.

4. Sekoita putki vorteksoimalla ja sentrifugoi sen jälkeen.