NaOH:n valmisteleminen
Valmistele uusi 0,2 N NaOH natriumhydroksidi -liuoksen laimennus kirjastojen denaturoimiseksi sekvensointia varten. Ylimääräinen tilavuus valmistellaan, jotta pienet pipetointivirheet eivät vaikuta lopulliseen NaOH-pitoisuuteen.
1. | [25B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa. |
Reagenssi |
Tilavuus yhtä 25B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl) |
Tilavuus: kahta 25B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl) |
---|---|---|
Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi |
120 |
240 |
Kantaliuos 1N NaOH |
30 |
60 |
Näiden tilavuuksien tuloksena on 150 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 300 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.
2. | [10B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa. |
Reagenssi |
Tilavuus yhtä 10B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl) |
Tilavuus: kahta 10B-virtauskyvetti-virtauskyvettiä varten (µl) |
---|---|---|
Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi |
80 |
160 |
Kantaliuos 1N NaOH |
20 |
40 |
Näiden tilavuuksien tuloksena on 100 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 200 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.
3. | [1.5B] Yhdistä seuraavat tilavuudet mikrosentrifugiputkessa. |
Reagenssi |
Tilavuus yhtä 1.5B-virtauskyvetille-virtauskyvettiä varten (µl) |
Tilavuus: kahta 1.5B-virtauskyvetille-virtauskyvettiä varten (µl) |
---|---|---|
Laboratoriokäyttöön tarkoitettu vesi |
20 |
40 |
Kantaliuos 1N NaOH |
5 |
10 |
Näiden tilavuuksien tuloksena on 25 μl 0,2 N NaOH -liuosta yhdelle virtauskyvetille tai 50 μl 0,2 N NaOH -liuosta kahdelle virtauskyvetille.
4. | Sekoita putki vorteksoimalla ja sentrifugoi sen jälkeen. |