Laboratorion valmisteleminen PCR-menetelmiä varten

Osa kirjaston valmistamiseen käytettävistä menetelmistä edellyttää polymeraasiketjureaktiomenetelmän (polymerase chain reaction, PCR) käyttöä.

Luo tarkoituksenmukaiset alueet ja laboratoriomenetelmät PCR-tuotteiden aiheuttaman kontaminoitumisen estämiseksi, ennen kuin aloitat laboratoriotyöskentelyn. PCR-tuotteet voivat kontaminoida reagensseja, laitteita ja näytteitä, mikä viivästyttää normaaleja toimintoja ja aiheuttaa epätarkkoja tuloksia.

Noudata seuraavia ohjeita ristikontaminaation välttämiseksi.

• Luo PCR-menetelmiä varten ennen PCR-menetelmää käytettävä alue.
• Luo PCR-tuotteiden käsittelyä varten jälki-PCR-alue.
• Älä käytä samaa pesuallasta esi-PCR- ja jälki-PCR-materiaalien pesuun.
• Älä käytä samaa vedenpuhdistusjärjestelmää esi-PCR- ja jälki-PCR-alueilla.
• Säilytä esi-PCR-käytännöissä käytetyt tarvikkeet esi-PCR-alueella. Siirrä ne jälki-PCR-alueelle tarpeen mukaan.
• Älä käytä samoja laitteita ja tarvikkeita esi-PCR- ja jälki-PCR-menetelmissä. Käytä kummallakin alueella vain näille tarkoitettuja laitteita ja tarvikkeita.
• Järjestä kummallakin alueella käytettäville tarvikkeille omat erilliset säilytyspaikkansa. Katso säilytyslämpötilaa koskevat vaatimukset ja tarvikkeiden mitat kohdasta Sekvensointitarvikkeet.