Preparare il NaOH
Preparare una diluizione fresca di 0,2 N di NaOH sodium hydroxide alle librerie denaturate per il sequenziamento. Viene preparato del volume supplementare per evitare che piccoli errori di pipettaggio influiscano sulla concentrazione finale di NaOH.
| 1. | [25B] Combinare i volumi seguenti in una provetta per microcentrifuga. |
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Reagente |
Volume per Una Cella a flusso 25B (μl) |
Volume per Due Cella a flusso 25B (μl) |
|---|---|---|
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Acqua da laboratorio |
120 |
240 |
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Scorte 1N NaOH |
30 |
60 |
Con questi volumi si ottengono 150 µl di 0,2 N di NaOH per una cella a flusso oppure 300 µl di 0,2 N di NaOH per due celle a flusso.
| 2. | [10B] Combinare i volumi seguenti in una provetta per microcentrifuga. |
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Reagente |
Volume per Una Cella a flusso 10B (μl) |
Volume per Due Cella a flusso 10B (μl) |
|---|---|---|
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Acqua da laboratorio |
80 |
160 |
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Scorte 1N NaOH |
20 |
40 |
Con questi volumi si ottengono 100 µl di 0,2 N di NaOH per una cella a flusso oppure 200 µl di 0,2 N di NaOH per due celle a flusso.
| 3. | [1,5B] Combinare i volumi seguenti in una provetta per microcentrifuga. |
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Reagente |
Volume per Una Cella a flusso 1.5B (μl) |
Volume per Due Cella a flusso 1.5B (μl) |
|---|---|---|
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Acqua da laboratorio |
20 |
40 |
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Scorte 1N NaOH |
5 |
10 |
Con questi volumi si ottengono 25 µl di 0,2 N di NaOH per una cella a flusso oppure 50 µl di 0,2 N di NaOH per due celle a flusso.
| 4. | Utilizzare un vortex, quindi centrifugare la provetta per miscelare. |
