Allestimento del laboratorio per le procedure della PCR

Alcuni metodi di preparazione delle librerie richiedono il processo di reazione di polimerizzazione a catena (Polymerase Chain Reaction, PCR).

Per impedire la contaminazione da PCR, è necessario creare spazi dedicati e procedure di laboratorio prima di iniziare a lavorare nel laboratorio. I prodotti della PCR possono contaminare i reagenti, gli strumenti e i campioni, ritardando il normale funzionamento e fornendo risultati inaccurati.

Utilizzare le seguenti linee guida per evitare la contaminazione incrociata.

• Creare un’area pre-PCR per i processi di pre-PCR.
• Creare un’area post-PCR per elaborare i prodotti per la PCR.
• Non utilizzare lo stesso lavandino per lavare i materiali di pre-PCR e post-PCR.
• Non utilizzare lo stesso sistema di purificazione dell’acqua per i processi di pre-PCR e post-PCR.
• Conservare i prodotti usati per i protocolli pre-PCR nell’area pre-PCR. Trasferirli nell’area post-PCR in base alle necessità.
• Non utilizzare le stesse apparecchiature e gli stessi materiali per i processi di pre-PCR e post-PCR. Dedicare un set di apparecchiature e materiali separati in ciascuna area.
• Creare spazi di conservazione dedicati per i materiali di consumo utilizzati in ciascuna area. Per i requisiti della temperatura di conservazione e le dimensioni dei materiali di consumo, consultare Sequencing Consumables.