カスタムプライマーの調製と添加

1.

凍結している場合は、使用する各カスタムプライマーを融解します。

2.

NovaSeq X Series Custom Primer Bufferを使用してカスタムプライマーを希釈し、次の分量を最終濃度0.3 µMに調製します。カスタムのインデックスリードを得るためにプライマーを組み合わせたり、その他、どのような混合プライマーを作成する場合でも、各プライマーの最終濃度は0.3 µMにする必要があります。

カスタムプライマー	1.5Bフローセルの 分量（mL）	10Bもしくは25Bフローセルの 分量（mL）
カスタムリード1プライマー	3.0	5.0
カスタムリード2プライマー	3.0	5.0
カスタムインデックス1および2プライマー混合液	5.0	6.0

1.

Polynit Heatseal Wipeを使用して、各カスタムプライマー位置を覆っているホイルシールをきれいに拭きます。

位置	カスタムプライマー
CP1	カスタムリード1プライマー
CP2	カスタムリード2プライマー
CP3	カスタムインデックス1および2プライマー混合液

2.

清浄なピペットチップを使用して、各カスタムプライマー位置を覆っているホイルシールに穴を開けます。

3.

次の分量のカスタムプライマーを試薬カートリッジの適切な位置に添加します。プライマーを分注する際に、ピペットチップがホイルシールに触れないようにしてください。

位置	カスタムプライマー	1.5Bフローセルの 分量（mL）	10Bもしくは25Bフローセルの 分量（mL）
CP1	カスタムリード1プライマー	3.0	5.0
CP2	カスタムリード2プライマー	3.0	5.0
CP3	カスタムインデックス1および2プライマー混合液	5.0	6.0