Prepare and Add Custom Primers (Klargjøre og legge til tilpassede primere)

Tilpassede primere klargjøres ved hjelp av NovaSeq X Series sin tilpassede primerbuffer og legges deretter til i reagenskassetten. Kontroller at reagenskassetten er tint og inspisert før du fortsetter.

Prepare Custom Primers (Klargjør tilpassede primere)

1.

Hvis den er frosset, tiner du hver tilpasset primer som skal brukes.

2.

Bruk NovaSeq X Series tilpasset primerbuffer til å fortynne tilpassede primere for å gi følgende volumer ved endelig konsentrasjon på 0,3 μM. Når primere kombineres for å lage den tilpassede indeksavlesningen eller en hvilken som helst tilpasset avlesningsprimerblanding, skal hver primer ha en endelig konsentrasjon på 0,3 μM.

Custom Primer (Tilpasset primer)	Volum (ml) for 1.5B-flytcelle	Volum (ml) for 10B eller 25B flytcelle
Tilpasset avlesning 1 primer	3.0	5.0
Tilpasset avlesning 2 primer	3.0	5.0
Tilpasset indeks 1- og 2-primerblanding	5.0	6,0

Legg til tilpassede primere

1.

Bruk en Polynit-varmeforseglingsserviett til å tørke av folieforseglingen som dekker hver tilpasset primerposisjon.

Posisjon	Custom Primer (Tilpasset primer)
CP1	Tilpasset avlesning 1 primer
CP2	Tilpasset avlesning 2 primer
CP3	Tilpasset indeks 1- og 2-primerblanding

2.

Bruk en ren pipettespiss til å stikke hull på folieforseglingen som dekker hver tilpassede primerposisjon.

3.

Tilsett følgende volumer av tilpasset primer til riktig posisjon på reagenskassetten. Unngå å ta på folieforseglingen mens du dispenser primeren.

Posisjon	Custom Primer (Tilpasset primer)	Volum (ml) for 1.5B-flytcelle	Volum (ml) for 10B eller 25B flytcelle
CP1	Tilpasset avlesning 1 primer	3.0	5.0
CP2	Tilpasset avlesning 2 primer	3.0	5.0
CP3	Tilpasset indeks 1- og 2-primerblanding	5.0	6,0