Przygotowanie NaOH
Przygotować świeży roztwór 0,2 N NaOH sodium hydroxide do bibliotek denaturacji do sekwencjonowania. Dodatkowa objętość jest przygotowana, aby zapobiec wpływowi drobnych błędów pipetowania na końcowe stężenie NaOH.
| 1. | [25B] Połączyć podane poniżej objętości w probówce do mikrowirówki. |
|
Odczynnik |
Objętość dla jednej Komora przepływowa 25B (μl) |
Objętość dla dwóch Komora przepływowa 25B (μl) |
|---|---|---|
|
Woda o jakości laboratoryjnej |
120 |
240 |
|
Podstawowy roztwór 1N NaOH |
30 |
60 |
Te objętości powodują 150 μl 0,2 N NaOH dla jednej komory przepływowej lub 300 μl 0,2 N NaOH dla dwóch komór przepływowych.
| 2. | [10B] Połączyć podane poniżej objętości w probówce do mikrowirówki. |
|
Odczynnik |
Objętość dla jednej Komora przepływowa 10B (μl) |
Objętość dla dwóch Komora przepływowa 10B (μl) |
|---|---|---|
|
Woda o jakości laboratoryjnej |
80 |
160 |
|
Podstawowy roztwór 1N NaOH |
20 |
40 |
Te objętości powodują 100 μl 0,2 N NaOH dla jednej komory przepływowej lub 200 μl 0,2 N NaOH dla dwóch komór przepływowych.
| 3. | [1,5B] Połączyć podane poniżej objętości w probówce do mikrowirówki. |
|
Odczynnik |
Objętość dla jednej Komora przepływowa 1,5B (μl) |
Objętość dla dwóch Komora przepływowa 1,5B (μl) |
|---|---|---|
|
Woda o jakości laboratoryjnej |
20 |
40 |
|
Podstawowy roztwór 1N NaOH |
5 |
10 |
Te objętości powodują 25 μl 0,2 N NaOH dla jednej komory przepływowej lub 50 μl 0,2 N NaOH dla dwóch komór przepływowych.
| 4. | Przeprowadzić worteksowanie, a następnie odwirować probówkę w celu wymieszania. |
