Preparar NaOH
Prepare uma diluição fresca de 0,2 N de NaOH hidróxido de sódio para desnaturar bibliotecas para o sequenciamento. Volume extra é preparado para evitar que pequenos erros de pipetagem afetem a concentração final de NaOH.
| 1. | [25B] Combine os volumes a seguir em um tubo de microcentrífuga. |
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Reagente |
Volume para um Lâmina de fluxo 25B (μl) |
Volume para dois Lâmina de fluxo 25Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água aprovada para uso em laboratório |
120 |
240 |
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Estoque de 1N NaOH |
30 |
60 |
Esses volumes resultam em 150 µl 0,2 N de NaOH2 para uma lâmina de fluxo ou 300 µl 0,2 N de NaOH para duas lâminas de fluxo.
| 2. | [10B] Combine os volumes a seguir em um tubo de microcentrífuga. |
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Reagente |
Volume para um Lâmina de fluxo 10B (μl) |
Volume para dois Lâmina de fluxo 10Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água aprovada para uso em laboratório |
80 |
160 |
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Estoque de 1N NaOH |
20 |
40 |
Esses volumes resultam em 100 µl 0,2 N de NaOH2 para uma lâmina de fluxo ou 200 µl 0,2 N de NaOH para duas lâminas de fluxo.
| 3. | [1.5B] Combine os volumes a seguir em um tubo de microcentrífuga. |
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Reagente |
Volume para um Lâmina de fluxo 1.5B (μl) |
Volume para dois Lâmina de fluxo 1.5Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água aprovada para uso em laboratório |
20 |
40 |
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Estoque de 1N NaOH |
5 |
10 |
Esses volumes resultam em 25 µl 0,2 N de NaOH2 para uma lâmina de fluxo ou 50 µl 0,2 N de NaOH para duas lâminas de fluxo.
| 4. | Agite e, em seguida, centrifugue o tubo para misturar. |
