Preparar NaOH
Prepare uma nova diluição de NaOH sodium hydroxide a 0,2 N para desnaturar bibliotecas para sequenciação. É preparado um volume extra para evitar que pequenos erros de pipetagem afetem a concentração final de NaOH.
| 1. | [25B] Combine os seguintes volumes num tubo de microcentrifugação. |
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Reagente |
Volume para um Célula de fluxo 25B (μl) |
Volume durante dois Célula de fluxo 25Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água laboratorial |
120 |
240 |
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Stock 1N NaOH |
30 |
60 |
Estes volumes resultam em 150 μl de NaOH a 0,2 N para uma célula de fluxo ou 300μl de NaOH a 0,2N para duas células de fluxo.
| 2. | [10B] Combine os seguintes volumes num tubo de microcentrifugação. |
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Reagente |
Volume para um Célula de fluxo 10B (μl) |
Volume durante dois Célula de fluxo 10Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água laboratorial |
80 |
160 |
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Stock 1N NaOH |
20 |
40 |
Estes volumes resultam em 100 μl de NaOH a 0,2 N para uma célula de fluxo ou 200 μl de NaOH a 0,2 N para duas células de fluxo.
| 3. | [1,5B] Combine os seguintes volumes num tubo de microcentrifugação. |
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Reagente |
Volume para um Célula de fluxo 1,5B (μl) |
Volume durante dois Célula de fluxo 1,5Bs (μl) |
|---|---|---|
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Água laboratorial |
20 |
40 |
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Stock 1N NaOH |
5 |
10 |
Estes volumes resultam em 25 μl de NaOH a 0,2 N para uma célula de fluxo ou 50 μl de NaOH a 0,2 N para duas células de fluxo.
| 4. | Agite com o vórtex e, em seguida, centrifugue o tubo para misturar. |
