Điều chế NaOH
Chuẩn bị dung dịch pha loãng mới 0,2 N NaOH sodium hydroxide để biến tính thư viện cho việc giải trình tự. Thể tích bổ sung được điều chế để ngăn ngừa các lỗi pipet nhỏ ảnh hưởng đến nồng độ NaOH cuối cùng.
1. | [25B] Trộn các thể tích sau trong ống ly tâm micro. |
Thuốc thử |
Thể tích cho Một Tế bào dòng chảy 25B (μl) |
Thể tích cho Hai Tế bào dòng chảy 25B (μl) |
---|---|---|
Nước ở cấp độ dùng trong phòng thí nghiệm |
120 |
240 |
Dự trữ 1N NaOH |
30 |
60 |
Các thể tích này mang lại 150 μl 0,2 N NaOH cho một tế bào dòng chảy hoặc 300 µl 0,2 N NaOH cho hai tế bào dòng chảy.
2. | [10B] Trộn các thể tích sau trong ống ly tâm micro. |
Thuốc thử |
Thể tích cho Một Tế bào dòng chảy 10B (μl) |
Thể tích cho Hai Tế bào dòng chảy 10B (μl) |
---|---|---|
Nước ở cấp độ dùng trong phòng thí nghiệm |
80 |
160 |
Dự trữ 1N NaOH |
20 |
40 |
Các thể tích này mang lại 100 μl 0,2 N NaOH cho một tế bào dòng chảy hoặc 200 μl 0,2 N NaOH cho hai tế bào dòng chảy.
3. | [1.5B] Trộn các thể tích sau trong ống ly tâm micro. |
Thuốc thử |
Thể tích cho Một Tế bào dòng chảy 1.5B (μl) |
Thể tích cho Hai Tế bào dòng chảy 1.5B (μl) |
---|---|---|
Nước ở cấp độ dùng trong phòng thí nghiệm |
20 |
40 |
Dự trữ 1N NaOH |
5 |
10 |
Các thể tích này mang lại 25 μl 0,2 N NaOH cho một tế bào dòng chảy hoặc 50 µl 0,2 N NaOH cho hai tế bào dòng chảy.
4. | Xoáy, và sau đó ly tâm ống vài lần để trộn. |