准备和添加自定义引物
使用 NovaSeq X 系列 自定义引物缓冲液制备自定义引物,然后添加到试剂夹盒中。在继续操作之前,确保已解冻并检查试剂夹盒。
| 1. | 如果冷冻,解冻每个要使用的自定义引物。 |
| 2. | 使用 NovaSeq X 系列 自定义引物缓冲液稀释自定义引物,在 0.3 µM 最终浓度下产生以下剂量。当组合引物以制备自定义标签读段或任何自定义读段引物混合物时,每个引物的最终浓度应为 0.3 微米。 |
|
自定义引物 |
体积(ml) 1.5B 流动槽 |
体积(ml) 10B 或 25B 流动槽 |
|---|---|---|
|
自定义读段 1 引物 |
3.0 |
5.0 |
|
自定义读段 2 引物 |
3.0 |
5.0 |
|
自定义标签 1 和 2 引物混合物 |
5.0 |
6.0 |
| 1. | 使用 Polynit 热封擦拭布擦拭覆盖每个自定义引物位置的封箔。 |
|
位置 |
自定义引物 |
|---|---|
|
CP1 |
自定义读段 1 引物 |
|
CP2 |
自定义读段 2 引物 |
|
CP3 |
自定义标签 1 和 2 引物混合物 |
| 2. | 使用干净的移液管吸头刺穿覆盖每个自定义引物位置的封箔。 |
| 3. | 将以下剂量的自定义引物添加到试剂盒上的适当位置。分配引物时,避免碰到封箔口。 |
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位置 |
自定义引物 |
体积(ml) 1.5B 流动槽 |
体积(ml) 10B 或 25B 流动槽 |
|---|---|---|---|
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CP1 |
自定义读段 1 引物 |
3.0 |
5.0 |
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CP2 |
自定义读段 2 引物 |
3.0 |
5.0 |
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CP3 |
自定义标签 1 和 2 引物混合物 |
5.0 |
6.0 |
